1、對納米藥物輸送機制的質(zhì)疑
由于腫瘤生長速度明顯高于正常組織，腫瘤血管內(nèi)皮細胞之間存在缺陷，排列不緊密，具有滲透性，且腫瘤內(nèi)部淋巴引流不足，血液流速較低，納米粒子一旦進入，便會被滯留在腫瘤部位，這種現(xiàn)象稱為EPR（enhanced permeability and retention）效應(yīng)。EPR效應(yīng)自上世紀(jì)80年代末報道以來，被公認為是納米粒子在腫瘤部位富集的主要因素。但近期，多倫多大學(xué)的Warren C. W. Chan團隊探討了納米顆粒的腫瘤滲透現(xiàn)象，并對納米粒子進入實體腫瘤的機制提出了質(zhì)疑。充分的證據(jù)表明，轉(zhuǎn)胞吞作用可能是納米粒子在腫瘤部位富集的主要機制。該文以“The entry of nanoparticles into solid tumours”為題發(fā)表在Nature Materials上。由于結(jié)論顛覆了以往認知，該文一出便受到研究者廣泛關(guān)注，Nature Materials一天內(nèi)刊登了關(guān)于該文的社論、新聞與觀點、評論文章三篇文章，呼吁進一步探究腫瘤治療的挑戰(zhàn)與未來。
內(nèi)皮細胞間的間隙被認為是EPR效應(yīng)的主導(dǎo)因素之一，但是作者通過研究觀察發(fā)現(xiàn)，內(nèi)皮細胞間隙出現(xiàn)的頻率并不高。在所有腫瘤模型中，作者觀察了313根血管，只發(fā)現(xiàn)26處間隙，總間隙覆蓋率僅為血管表面積的0.048%，內(nèi)皮間間隙的數(shù)量比實驗測量的納米粒子積累的數(shù)量少60倍。這雖然為EPR效應(yīng)提供了證據(jù)，但不能充分解釋納米粒子在腫瘤部位的富集現(xiàn)象。
然后作者研究了轉(zhuǎn)胞吞作用對納米粒子在腫瘤部位富集的影響。胞吞作用是一種需要內(nèi)皮細胞重新排列細胞骨架和細胞膜的活性代謝過程，包括形成可以吸收納米顆粒的囊泡，形成稱為孔壁的橫膈膜或通過細胞質(zhì)轉(zhuǎn)運。作者制備了三種尺寸（(15 nm、50 nm和100 nm）的金納米粒子AuNPs，在TEM照片中明顯觀察到轉(zhuǎn)運AuNPs的囊泡，且AuNPs與腫瘤血管內(nèi)皮細胞有明顯相互作用并被后者吸收，為轉(zhuǎn)胞吞提供了直接證據(jù)。
考慮到兩種機制的共存，作者進一步對哪種機制起到主導(dǎo)作用進行了驗證。通過建立小鼠模型，使其在保留血管結(jié)構(gòu)的同時喪失其他細胞活性，將被動的內(nèi)皮細胞間隙因素和主動的轉(zhuǎn)胞吞作用分離。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)阻斷轉(zhuǎn)胞吞途徑后，AuNPs在腫瘤部位的富集量明顯減少。進一步通過數(shù)據(jù)分析，經(jīng)內(nèi)皮細胞間隙滲漏進入腫瘤的AuNPs只占總數(shù)的3-25%（取決于AuNPs的粒徑）。以上這些結(jié)果顛覆了早期人們對EPR效應(yīng)的理解，極有可能影響后期納米藥物的設(shè)計思路。
2、對納米藥物發(fā)展瓶頸的新認知
這篇社論審視了納米藥物在臨床應(yīng)用上遇到的瓶頸，坦言傳統(tǒng)的EPR效應(yīng)機制受到了挑戰(zhàn)。哈佛大學(xué)的David Mooney和Irene de Lázaro對該文進行總結(jié)，強調(diào)這些顛覆性的發(fā)現(xiàn)，并呼吁人們重新審視在納米粒子傳遞機制方面建立已久的模式。
這不是EPR效應(yīng)第一次受到爭議，近年來，跨物種和腫瘤類型的血管系統(tǒng)異質(zhì)性，以及腫瘤微環(huán)境其他參數(shù)的可變性，讓人們對EPR效應(yīng)產(chǎn)生懷疑。過去30年里，為癌癥治療開發(fā)的納米藥物層出不窮，設(shè)計越來越復(fù)雜。但到目前為止，只有10種納米藥物通過了FDA的審批，僅有14%的藥物顯示有臨床療效。研究表明，經(jīng)系統(tǒng)給藥后，僅有0.7%的納米藥物到達實體腫瘤。毫無疑問，納米藥物在癌癥治療中是有益的。作為化療藥物的載體，它們通過限制全身毒性，極大地增強了患者的耐受性。然而，令人遺憾的是，高流失率導(dǎo)致人們對納米醫(yī)學(xué)的效力產(chǎn)生了一些懷疑。納米藥物的療效差主要是因為納米粒子在腫瘤中的積累不足和藥代動力學(xué)差。
作者的研究結(jié)果讓人們注意到這個領(lǐng)域?qū)δ[瘤外溢機制的有限理解，以及對EPR效應(yīng)的關(guān)注可能混淆了納米藥物的設(shè)計。其他的納米顆粒參數(shù)，包括材料組成、幾何形狀、表面化學(xué)、電荷和機械性能等，都會影響其與生物屏障的相互作用，并可能影響其外滲作用的相對重要性和具體機制。
3、轉(zhuǎn)胞吞作用于癌癥納米醫(yī)學(xué)的新機遇
雖然作者的結(jié)果表明，轉(zhuǎn)胞吞作用確實可以作為納米粒子進入實體腫瘤的主導(dǎo)機制，但他們只研究了三種尺寸的AuNPs，EPR效應(yīng)對15 nm、50 nm、100 nm的AuNPs在腫瘤富集的貢獻分別為12%、3%和25%，這種趨勢與通常的認知不符，因此，可能存在更為復(fù)雜的途徑影響了50 nm粒子的EPR效應(yīng)，有待進一步研究。
目前，關(guān)于胞吞作用的機制細節(jié)，以及觸發(fā)納米粒子在血管內(nèi)皮內(nèi)的細胞攝取、運輸和釋放的結(jié)構(gòu)因素，我們知之甚少。有研究表明，受體-糖蛋白結(jié)合、電荷反轉(zhuǎn)過程可以觸發(fā)轉(zhuǎn)胞吞作用。抗體、核酸、多肽甚至碳水化合物等大分子都可以附著在納米顆粒表面進行選擇性靶向和轉(zhuǎn)運。伊利諾伊大學(xué)的聶書明和同事表示，這些發(fā)現(xiàn)應(yīng)該激勵研究人員開發(fā)利用主動轉(zhuǎn)胞吞作用提高遞送效率的技術(shù)，包括使用腫瘤穿膜肽、設(shè)計陽離子聚合物偶聯(lián)物、允許吸附介導(dǎo)的主動胞吞作用等。
除了轉(zhuǎn)胞吞，利用納米技術(shù)增強免疫響應(yīng)為腫瘤治療提供了新思路。與設(shè)計需要克服血管內(nèi)皮細胞屏障的納米粒子相比，利用免疫細胞摧毀腫瘤更為有效。首先，只需要激活一小部分免疫細胞就能引起抗腫瘤免疫響應(yīng)，而傳統(tǒng)化療等都需要向腫瘤輸送大量藥劑，造成嚴(yán)重的副作用。其次免疫治療會產(chǎn)生免疫記憶，有效防止腫瘤復(fù)發(fā)，同時還能有效抑制腫瘤向遠端轉(zhuǎn)移。納米粒子能夠?qū)崿F(xiàn)多種免疫藥物的同時輸送，通過多種機制誘導(dǎo)免疫反應(yīng)，因此，利用納米載體向腫瘤特異性輸送免疫藥物將會是一個很有前景的方向。此外，納米粒子獨特的光學(xué)性質(zhì)可以與治療性相結(jié)合，開發(fā)用于癌癥免疫治療的多模式藥物載體。
4、專家建議
也許，正是人們對EPR效應(yīng)的高估造成了納米藥物發(fā)展的瓶頸。為了理解納米粒子與人體相互作用的基本原理，哈佛大學(xué)的David Mooney和Irene de Lázaro呼吁科學(xué)界應(yīng)該將更多的注意力轉(zhuǎn)向基礎(chǔ)研究。該領(lǐng)域還應(yīng)該與生命科學(xué)家和腫瘤學(xué)家進行更密切的合作，因為他們對腫瘤生物學(xué)和患者特異性有更好的認識。最終，為了在癌癥納米醫(yī)學(xué)上取得進展，還需要更多大膽的研究來真正挑戰(zhàn)現(xiàn)有的模式。
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參考文獻：
https://doi.org/10.1038/s41563-020-0676-x
