葡萄糖是細(xì)胞生長(zhǎng)過程中最基本的能量來源,直接參與細(xì)胞代謝氧化生成腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)。腫瘤細(xì)胞的代謝途徑異于正常細(xì)胞,即使在氧氣充足情況下腫瘤細(xì)胞也更加傾向于通過糖酵解途徑代謝,造成了腫瘤細(xì)胞大量消耗周邊環(huán)境中的葡萄糖等養(yǎng)分。

對(duì)腫瘤代謝過程的監(jiān)控是深入理解腫瘤生長(zhǎng)機(jī)理、藥物抑制作用的重要方法之一,為傳統(tǒng)的細(xì)胞生物學(xué)方法提供新的研究切入點(diǎn)。如何在細(xì)胞培養(yǎng)原位連續(xù)檢測(cè)腫瘤代謝微環(huán)境的連續(xù)參數(shù)變化對(duì)生物傳感器的制備提出了極大的挑戰(zhàn)。

本團(tuán)隊(duì)基于聚砜梯度中空纖維膜構(gòu)建了集細(xì)胞培養(yǎng)與原位電化學(xué)檢測(cè)集于一體的生物電化學(xué)傳感系統(tǒng)。首先在中空纖維膜內(nèi)壁層層組裝納米碳管-普魯士藍(lán)-酶的復(fù)合電化學(xué)傳感結(jié)構(gòu),然后在較為致密的中空纖維膜外壁進(jìn)行細(xì)胞貼壁培養(yǎng)。

利用中空纖維膜的內(nèi)外表面實(shí)現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)與電化學(xué)檢測(cè)區(qū)域隔離,避免細(xì)胞與電極直接接觸,減少電流對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,同時(shí)代謝物質(zhì)通過多孔膜管壁實(shí)現(xiàn)內(nèi)外環(huán)境平衡,以實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期電化學(xué)監(jiān)測(cè)。多孔結(jié)構(gòu)增強(qiáng)了酶電極的穩(wěn)定性,并且通過引入普魯士藍(lán)層消耗催化反應(yīng)產(chǎn)生的H2O2,減少長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)中H2O2的蓄積。

構(gòu)建的細(xì)胞培養(yǎng)與葡萄糖檢測(cè)系統(tǒng)通過對(duì)肺癌細(xì)胞生長(zhǎng)加藥進(jìn)行實(shí)際監(jiān)測(cè),初步證實(shí)了膜電極在細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞代謝環(huán)境中葡萄糖物質(zhì)連續(xù)檢測(cè)中的可行性,將進(jìn)一步深入應(yīng)用于藥物篩選和細(xì)胞代謝研究。

?浙江大學(xué)黃小軍/杭師大醫(yī)學(xué)院陳大競(jìng)、謝恬合作:關(guān)于梯度膜細(xì)胞傳感新成果

相關(guān)成果以“In-situ monitoring of glucose metabolism?in cancer cell microenvironment based on?hollow fiber?structure”為題發(fā)表在高水平期刊Biosensors and Bioelectronics(IF=9.518)。

論文的第一作者為杭州師范大學(xué)藥學(xué)院碩士研究生馬珍;論文指導(dǎo)老師為杭州師范大學(xué)醫(yī)學(xué)院陳大競(jìng)教授、謝恬教授以及浙江大學(xué)高分子科學(xué)與工程學(xué)系黃小軍副教授。該項(xiàng)工作得到了國(guó)家自然科學(xué)基金、浙江省自然科學(xué)基金等項(xiàng)目的資助。

論文鏈接:

https://doi.org/10.1016/j.bios.2020.112261

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